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Bioss 抗体的使用和保存方法

 

抗体,无论是保存还是运输,都要避免反复冻融。反复冻融,冰晶会破坏抗体的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体,从而降低抗体的结合能力,也加快了抗体球蛋白的降解速度。抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果,如果抗体保存得当,Bioss的抗体活性大部分都可以维持数年。下面就给大家讲解下,Bioss抗体的使用和保存方法:

一、收到抗体后的操作
收到Bioss抗体后(大部分抗体是溶液态),请务必在 4℃,12000rpm,离心3分钟,再打开管盖进行分装、溶解和保存(如果抗体体积小于50ul,请延长离心时间至5 分钟,以保证全部抗体均离心下来,干粉状态的同样适用)。Bioss抗体使用特制的储存管,只有在12000rpm 离心3分钟,才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来(即使是在10000rpm离心也会离心不完全,导致出现抗体的量不足的现象)。请按照说明书推荐的保存条件正确保存和使用抗体。

二、抗体的长期保存
对于Bioss大部分抗体,比较合适的保存方式是:分装后保存在-20℃或者-80℃。
(1)对绝大多数Bioss抗体来说,保存在-20℃就完全足够了。
(2)分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。
(3)分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。
(4)复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4℃,避免再冻起来。
(5)抗体工作液应该当天配制当天用完,4℃保存尽量不要超过1天。

三、抗体的短期保存
大部分Bioss抗体,在4℃短暂保存1~2 周对抗体活性没有影响。如果抗体很快会使用(1~2 周内),推荐在4℃保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害,如果要长期保存,则最好是在-20℃或者-80℃。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体。腹水形式的抗体产品请在收到后立即冻起来,因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4℃保存会导致抗体的降解。

四、体的运输条件
一般国内的的运输过程需要2-5天的时间,是在低温4℃的条件下来完成的。 4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以抗体运输过程中绝对避免干冰运输。

五、抗体的稳定性
(1) 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果,抗体是免疫系统中最重要的分子之一,其稳定性是自然进化筛选的结果,在众多物种中,抗体分子形成了保守而稳定的结构。
(2)抗体分子的高Tm值,在室温下,甚至短时间温度达到50~60℃,抗体分子都能维持正确折叠,保持其应有的活性。
(3)抗体的纯度。Bioss采用先进的抗体纯化技术,确保抗体产品的高纯度,保障其抗体产品的稳定性。
(4)抗体的浓度。高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失,高浓度的抗体稳定性更好。Bioss大部分抗体浓度为1mg/ml,抗体纯度高,特异性好,效价更高。

六、关于加入甘油保存
有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20℃会降低冰点,这对很多抗体可能是可行的。加入甘油的溶液不建议在-80℃保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染。

七、关于蛋白保护剂

蛋白在高浓度时更不容易降解(1mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。

 八、关于Proclin300的使用

为了防止微生物污染,Proclin300经常被加入到抗体中(终浓度0.03% (w/v))。Bioss的绝大部分抗体已经含有了0.03%的Proclin300,在说明书的储存缓冲液中有标明。

九、特殊抗体的保存条件
偶联抗体:所有偶联抗体都需要在棕色管中或使用锡箔纸避光 保存,尤其是荧光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的。

 

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